Cuando hablamos de Mieloma Múltiple (MM), hablamos del segundo tumor hematológico más común, con una incidencia aproximada de 4/100,000 pacientes/año. Esto indica una prevalencia de 60,000 pacientes (Europa). Su incidencia aumenta con la edad: 80% de pacientes > 60 años (raro en < 35 años.). Debido al aumento de la esperanza de vida se prevé un incremento notable en la incidencia de esta enfermedad.
Es una enfermedad poco conocida genéticamenente hablando y muy heterogénea en cuanto a la respuesta a los protocolos de tratamiento.
Con el objetivo de profundizar en la resolución a este problema nos planteamos realizar un estudio mediante tecnología de microarrays (genómica) y análisis genético para intentar averiguar el por qué de la heterogeneidad del Mieloma Múltiple y heterogeneidad en la respuesta a los tratamientos.
Los estudios de microarrays revelan que en la transformación de célula normal al estadio premaligno (Gammapatía Monoclonal de Significado Incierto, GMSI) están implicadas más alteraciones génicas que en el paso de este última estadio tumoral (MM). Muchas de estas alteraciones son debidas a inactivaciones de los genes por hipermetilación de sus promotores.
El trabajo analizó el estado de metilación de los siguientes genes en líneas celulares tumorales: p14, p15, p16, Socs1, Mgmt, p21, RB1, Ptem, MLH1, p73, p27, y 14-3-3. Encontramos hipermetilación en p16, Socs1, Mgmt, RB1, Ptem, y p73.
Sin embargo, sólo p16 presentaba una correlación con los niveles de RNA en la célula. Escogimos p16 para hacer un estudio en pacientes, y obtuvimos que la hipermetilación del promotor aumenta en el desarrollo tumoral desde los estadios premalignos a los estadios tumorales más agresivos. Además la presencia de metilación en p16 se correlaciona con una menor supervivencia global de los pacientes, y una mayor tasa de recaídas.
De los estudios genómicos iniciales nos dimos cuenta que un grupo de esos genes alterados estaban implicados en la segregación mitótica y división celular, por ello nos detuvimos a analizarlos con más detalle por su posible implicación en la producción de aneuploidías típicas del MM (alteraciones en el número de cromosomas). Del análisis de los siguientes genes: Mad2, Cdc20, Bub3, Bub1, Bub1l, Mad1, AurkB, Cenp-E, Kntc1, Ttk y AurkA, las muestras con ploidía normal tienen niveles más altos de expresión que las muestras aneuploides. Bub1R y Cenp-E discriminan casos aneuploides de los que no lo son con posible significado pronóstico. El tipo de ploidía nos arroja 4 genes que son Bub1R, Cenp-E, Kntc-1 y MAD2, que nos sirven para diferenciar entre muestras de diferentes tipo de ploidía. Además encontramos mutaciones y polimorfismos en Bubr1 no descritos hasta hoy a parte de los ya descritos en otros tumores y que pueden tener un papel importante en el desarrollo de la enfermedad.
Por último, realizamos ensayos de farmacogenómica. Analizamos la respuesta de las células de MM a distintos fármacos con el objetivo de analizar los mecanismos de acción de éstos y así desentramar las resistencias que algunas células tienen a dichos fármacos. Analizamos Melphalan, Doxorubicina, Bortezomid, AS2O3, Aplidina. De dichos estudios averiguamos que el mecanismo de acción del Melphalan es inhibiendo la replicación y transcripción del DNA. Que la Doxorubicina actúa en el bloqueo del ciclo celular e inducción de apoptosis. El Bortezomid activa las Heat shock proteins. El As2O3 actúa en la formación huso mitótico y segregación cromosómica y la Aplidina actúa en la transición de fase G2/M y en la inducción de apoptosis.
Todos estos estudios nos han permitido profundizar en la caracterización genómica y genética del MM y de esta forma establecer diferencias entre los distintos pacientes que nos llevan a pensar que esta enfermedad se compone de diversos subtipos con comportamientos diferentes frente al los tratamientos establecidos. Los resultados nos encaminan a un tratamiento individualizado de cada paciente en función de sus característica genéticas.
PUBLICACIONES:
1. Patricia Maiso, Xonia Carvajal-Vergara, Enrique M. Ocio, Ricardo López-Pérez, Gema Mateo, Norma Gutiérrez, Peter Atadja, Atanasio Pandiella, Jesús F. San Miguel. The HDAC inhibitor LBH589 is a potent anti-myeloma agent that overcomes drug resistance. Cancer Res. 2006 Jun 1;66(11):5781-9
2. Armellini A, García-Sanz R, López-Pérez R, Pollo-Martín I, Balanzategui A, Sarasquete ME, Mateos MV, Fuertes M, López R,3 Hernández JM, Fernández-Calvo J, Sierra M, Megido M, Orfão A, M González and JF San Miguel. DNA Methylation of p16, p15 and SOCS-1 Genes in Multiple Myeloma: A Critical View of Epigenetic Studies in Cancer; Leukemia 2006
3. Jesús San Miguel, Ramón García-Sanz, Ricardo López-Pérez. Análisis of Methylation Pattern in Multiple Myeloma. Acta Haematol 2005 114; 23-26
4. Xonia Carvajal-Vergara, Soraya Tabera, Juan C. Montero, Azucena Esparís-Ogando, Ricardo López-Pérez, Gema Mateo, Norma Gutiérrez, Atanasio Pandiella, and Jesús F. San Miguel. Multifunctional Role of Erk5 in Multiple Myeloma. Blood. 2005 Jun 1;105(11):4492-9
5. David González, Marcos González, Ana Balanzategui, Maria E. Sarasquete, Ricardo López-Pérez, M. Carmen Chillón, Ramón García-Sanz, Jesús F San Miguel. Molecular characteristics and gene segments usage in IgH gene rearrangements in multiple myeloma". Haematologica. 2005 Jul;90(7):906-13.